Fixação.
Repique.
Biópsia.
Desidratação.
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Charriot, micrométrico e macrométrico.
Diafragma, condensador e charriot.
Condensador, oculares e objetivas.
Platina, espelho e micrométrico.
Oculares, charriot e platina.
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Para a obtenção de cortes histológicos, o primeiro passo é fazer a microtomia do material coletado, estimulando a autólise e preservando a composição química do tecido.
Para a formação da imagem no microscópio de luz, o material biológico deve ser fino o suficiente para que a luz possa atravessá-lo.
O material biológico deve ser endurecido para ser cortado, o que é possível incluindo-o em uma substância que se solidifica depois de penetrá-lo, como, por exemplo, a parafina.
Como os tecidos são geralmente incolores, os histologistas inventaram soluções corantes que têm afinidades diferentes para certas organelas e estruturas, possibilitando a sua localização.
Para o material ser corado, a parafina deve ser dissolvida, o que é obtido ao se colocar a lâmina em xilol, e o tecido precisa ser hidratado, já que esses corantes são solúveis em água. A hidratação é conseguida passando a lâmina em uma série alcoólica decrescente e em água.
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O estudo de células vivas ou exame a fresco possibilita o estudo dos movimentos celulares, da mitose bem como a ação de diversas substâncias sobre essas células e da secreção pelas células, no entanto como as células e seus constituintes são transparentes, podem ser usados corantes supravitais, tais como a orceína e o verde Jano, que não levam à morte celular.
A fixação do material é a primeira etapa para a obtenção de um preparado permanente. Os fixadores têm como finalidade evitar a autólise, impedir a proliferação de bactérias, aumentar a afinidade das estruturas celulares pelos corantes usados na microscopia óptica e o contraste na microscopia eletrônica, além de endurecer as células para que resistam melhor às etapas da técnica.
Os agentes fixadores mais utilizados em microscopia óptica são tetróxido de ósmio e glutaraldeído, enquanto na microscopia eletrônica, são usados o formol e o Bouin. Esses fixadores coagulam as proteínas, causando modificações mínimas na estrutura celular e se combinam com os grupamentos amínicos das proteínas das membranas celulares.
A microtomia consiste em utilizar um micrótomo para obter cortes sucessivos, delgados e uniformes. Tecidos destinados ao estudo por microscopia óptica são incluídos em parafina ou resinas plásticas especiais e corados em espessura de 1 a 6 cm, enquanto para microscopia eletrônica, são incluídos em resina tipo epóxi e cortados em espessura de 0,2 a 0,1 μm. Para os dois procedimentos, utilizam-se navalhas de aço.
As estruturas celulares são transparentes e precisam ser coradas, baseadas na afinidade dos corantes. Desse modo, as que se coram por corantes ácidos são denominadas acidófilos, como o azul-de-toluidina e o azul-de-metileno, e as que se coram por corantes básicos são os basófilos, como a hematoxilina e a eosina. Esses corantes podem ser empregados em microscopia óptica e eletrônica.
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Iguais e sobrepostas.
Graduais e decrescentes.
Iguais e intercaladas.
Graduais e crescentes.
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O manuseio do condensador com diafragma.
A utilização do parafuso micrométrico.
A técnica de limpeza das lentes.
A utilização do charriot.
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1, 4, 3, 5, 2
4, 1, 2, 3, 5
3, 1, 5, 2, 4
2, 3, 5, 4, 1
1, 3, 4, 5, 2.
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III e IV
I e II
II e III
I e IV
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Ajustar o foco para que os feixes de luz aumentem a imagem.
Formar a imagem ampliada da objetiva na região de foco da ocular.
Aumentar a resolução da imagem focada.
Regular o contraste no microscópio.
Concentrar os raios luminosos na amostra que está sendo visualizada.
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A dimensão máxima que uma amostra pode ser visualizada.
O tamanho da imagem formada em relação à amostra observada.
A distância mínima entre dois pontos, que permite sua distinção.
O comprimento de onda da luz usada na fonte geradora.
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Basófilo que confere um tom azulado-escuro, principalmente aos componentes básicos das células.
ácido que confere um tom rosa às estruturas citoplasmáticas básicas da célula.
Acidófilo que confere um tom rosa aos componentes ácidos mais abundantes nas células, como o reticulo endoplasmático.
Básico que confere um tom azulado escuro, principalmente a componentes ácidos das células.
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Microscópio de fluorescência.
Microscópio eletrônico de transmissão.
Microscópio eletrônico de varredura.
Microscópio de campo escuro.
Microscópio de contraste de fase.
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Todas as afirmativas.
As afirmativas I, II e IV, somente.
As afirmativas I, II e III, somente.
As afirmativas II, III e IV, somente.
As afirmativas I e IV, somente.
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